Thermo Scientific Pierce 固定化胃蛋白酶瓊脂糖由酸性肽鏈內(nèi)切酶（胃蛋白酶）組成，該酶固定在微珠狀瓊脂糖樹脂上用于從抗體中生成和純化 Fab 和 F(ab')2 片段。

胃蛋白酶是一種在脊椎動(dòng)物胃粘膜層中以非活性前體形式（胃蛋白酶原）生成的非特異性酸性肽鏈內(nèi)切酶。有幾種胃蛋白酶，每種分子量為 35,000，最佳 pH 值為 1-3；pH 值為 > 6 時(shí)，該酶被永久滅活。胃蛋白酶具有廣泛的底物特異性。它優(yōu)先在芳香族氨基酸（比如苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）羧基處裂解蛋白。它不會(huì)在含有纈氨酸、丙氨酸或甘氨酸的鍵處裂解。在其他殘基處的裂解效率不同。

胃蛋白酶和其他蛋白水解酶用于各種蛋白的實(shí)驗(yàn)室分析。胃蛋白酶和木瓜蛋白酶通常用于生成抗體片段。木瓜蛋白酶用于將抗體裂解成含有單個(gè)抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的 Fab 片段。胃蛋白酶通過(guò)僅去除鉸鏈區(qū)以外的 Fc 結(jié)構(gòu)域部分產(chǎn)生 F(ab')2 片段。生成的 F(ab')2 片段包括兩個(gè)由鉸鏈區(qū)二硫化物結(jié)合的抗體結(jié)合 Fab 片段。

固定化胃蛋白酶可以在任何應(yīng)用中代替游離胃蛋白酶，且具有優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗鼛缀鯚o(wú)需自溶、消除了蛋白酶樣品的污染，還可以通過(guò)去除胃蛋白酶來(lái)控制酶切。固定化胃蛋白酶還能夠更加穩(wěn)定地抵抗熱誘導(dǎo)的變性，從而延長(zhǎng)活性維持時(shí)間。F(ab')2 制備試劑盒包含固定化胃蛋白酶、其他必要試劑和用于人、兔和小鼠抗體酶切的優(yōu)化方案。