Thermo Scientific Pierce 固定化無(wú)花果蛋白酶由巰基特異性蛋白酶（無(wú)花果蛋白酶）組成，該酶固定在微珠狀瓊脂糖樹脂上，以實(shí)現(xiàn)受控的抗體片段化（尤其是小鼠 IgG1）。

Pierce 固定化無(wú)花果蛋白酶的特點(diǎn)：

?可從小鼠 IgG1 中生成 Fab 和 F(ab')2 片段
?反應(yīng)可輕松控制
?抗體片段不含自身消化產(chǎn)物
?消除無(wú)花果蛋白酶對(duì)抗體片段的污染

無(wú)花果蛋白酶與木瓜蛋白酶相似，是一種從無(wú)花果乳膠中分離出的非特異性、巰基蛋白酶。無(wú)花果蛋白酶的分子量約為 25,000，在 pH 值 4-9.5 下有效，最佳 pH 值為 6.5。在存在半胱氨酸的條件下將 IgG 分子與無(wú)花果蛋白酶一起孵育時(shí)，鉸鏈區(qū)的一個(gè)或多個(gè)肽鍵分離，產(chǎn)生 Fab 片段或 F(ab')2 片段。使用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶明顯難以將小鼠 IgG1 酶切為功能性 Fab 或 F(ab')2 片段，然而，得率和免疫反應(yīng)性優(yōu)于使用無(wú)花果蛋白酶酶切小鼠 IgG1。固定化無(wú)花果蛋白酶專門設(shè)計(jì)用于將小鼠 IgG1 切割為 Fab 或 F(ab')2 片段，且具有優(yōu)勢(shì)，因?yàn)樗鼛缀鯚o(wú)需自溶、消除了樣品中的蛋白酶污染，還可以通過(guò)去除無(wú)花果蛋白酶或控制樣品在固定化無(wú)花果蛋白酶柱中的流速來(lái)控制酶切。

固定化無(wú)花果蛋白酶與游離酶相比能夠更加穩(wěn)定地抵抗熱誘導(dǎo)的變性，從而延長(zhǎng)活性維持時(shí)間。Fab 和 F(ab')2 制備試劑盒包含固定化無(wú)花果蛋白酶、其他必要試劑和用于小鼠 IgG1 酶切的優(yōu)化方案。無(wú)花果蛋白酶分別在存在 1 mM 半胱氨酸和 10 mM 半胱氨酸的條件下生成小鼠 IgG1 F(ab')2 和 Fab 片段。通過(guò)修飾半胱氨酸濃度和其他酶切參數(shù)，也可以從其他物種和同種型中生成片段。