紫外可見分光光度計(jì)是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中常用的分析儀器，它通過測(cè)量樣品在紫外到可見光區(qū)域的吸收光譜來提供有關(guān)樣品成分和濃度的信息。正確解讀其測(cè)試結(jié)果對(duì)于科研和生產(chǎn)都至關(guān)重要。

　　一、基本原理

　　紫外可見分光光度計(jì)基于朗伯-比爾定律，即溶液的吸光度與溶液的濃度和光程成正比。該定律是定量分析的基礎(chǔ)，它表明在相同條件下，物質(zhì)的濃度越高，其吸收的光就越多，因此吸光度值也越大。

　　二、測(cè)試結(jié)果的基本形式

　　測(cè)試結(jié)果通常呈現(xiàn)為一張光譜圖，橫軸為波長(zhǎng)(通常以納米為單位)，縱軸為吸光度。通過觀察光譜圖，我們可以確定樣品在哪些波長(zhǎng)下有吸收峰，從而推斷出樣品中可能存在的物質(zhì)。

　　三、定性分析

　　1. 吸收峰特征

　　在紫外可見光譜中，化合物的特征吸收峰是其生色團(tuán)和助色團(tuán)的特征表現(xiàn)。通過分析光譜圖上的吸收峰，我們可以初步判斷樣品中可能存在的官能團(tuán)和結(jié)構(gòu)。例如，C=C-C=C、C=C-C=O、苯環(huán)等結(jié)構(gòu)在紫外區(qū)有特定的吸收峰。

　　2. 與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照

　　如果手中有已知化合物的標(biāo)準(zhǔn)圖譜，可以將未知物的光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)圖譜進(jìn)行對(duì)比。如果兩者在吸收曲線的形狀、吸收峰的數(shù)目、位置、λmax(最大吸收波長(zhǎng))和相應(yīng)的εmax(摩爾吸光系數(shù))等方面一致，則可以初步認(rèn)為兩者是同一化合物。

　　四、定量分析

　　1. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

　　進(jìn)行定量分析前，需要制作一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線。這通常是通過測(cè)量一系列濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并將這些值與濃度繪制成圖來實(shí)現(xiàn)的。標(biāo)準(zhǔn)曲線反映了吸光度與濃度之間的線性關(guān)系。

　　2. 樣品濃度計(jì)算

　　將待測(cè)樣品的吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，通過線性插值或外推法即可求出樣品的濃度。這種方法簡(jiǎn)單、快捷，是紫外可見分光光度計(jì)定量分析的常用手段。

　　杭州仟諾生物致力于提供全面的實(shí)驗(yàn)室解決方案和高質(zhì)量的生物技術(shù)產(chǎn)品。代理銷售著密理博(Millipore)、賽默飛(Thermo Scientific)和艾本德(Eppendorf)等品牌產(chǎn)品，如有需求，可聯(lián)系17758005454仟諾生物。